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Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF英文名稱：Strep-Tactin Berpharose FF?貨號：B2778規格：1套本產品僅供科研實驗用，不做其它用途！
產品型號：廠商性質：生產廠家更新時間：2024-10-28訪 問 量：906
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Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF
英文名稱：Strep-Tactin Berpharose FF
貨號：B2778
1. 產品介紹
Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF是一種將Strep-Tactin鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質，主要用于純化Strep II標簽蛋白。Strep II標簽為8個氨基酸的小標簽（WSHPQFEK），由于標簽小，僅為1kDa左右，一般不影響融合后蛋白質的結構和功能，常用于融合表達蛋白質的檢測和純化。
本產品的配基Strep-Tactin是鏈霉親和素（Streptavidin）的突變體，與鏈霉親和素相比，Strep-Tactin對Strep II標簽的親和能力至少強10倍以上，能夠在溫和的條件下與Strep II融合蛋白結合和解離。由于Strep-Tacin對Strep II標簽具有高度特異性，一般一步純化就能獲得高純度的蛋白質樣品。
Strep II標簽蛋白與凝膠結合后可使用脫硫生物-素競爭方式進行洗脫，該洗脫方式比較溫和，一般不會影響蛋白質的性質。如蛋白質能耐受一定的堿，也可用堿液洗脫，比如10mM NaOH等。
2.規格
1ml（預裝柱）、5ml（預裝柱）、10ml（預裝柱）、20ml、100ml、500ml 純化流程
①推薦緩沖液
純化Strep II標簽蛋白
結合緩沖液：100mM Tris-HCl，150mM NaCl，1mM EDTA，pH8.0；
或20mM NaH2PO4，280mM NaCl，6mM KCl，pH7.4
洗脫緩沖液：結合緩沖液+ 2.5mM脫硫生物-素；
或10mM NaOH
再生緩沖液：0.5M NaOH；
或結合緩沖液+1mM HABA
②樣品準備
上柱的樣品應盡量保持與結合緩沖液一致。通常可用透析、超濾、稀釋等方法處
理樣品。并且上柱前應過0.45μm濾膜或高速離心去除不溶物。
③樣品純化
（1）平衡：取適量的Strep-Tactin Berpharose FF裝入合適的層析柱中，用蒸餾
水清洗5個柱體積去除保存液，再用結合緩沖液平衡5個柱體積，建議流速為100cm/h。
（2）上樣：將準備好的樣品上柱，建議流速為20-100cm/h，可根據實際結合情
況選擇流速，能獲得較好的效果。
（3）再平衡：上樣后用結合緩沖液平衡10個柱體積以上，或平衡至基線，洗去
雜質，推薦流速為100cm/h。
（4）洗脫：用洗脫緩沖液洗10-20個柱體積，建議流速為100cm/h，收集的洗脫
液應立即調節pH至穩定范圍，并根據需要置換緩沖液。
（5）NaOH再生：洗脫目的蛋白后的柱子用蒸餾水清洗3-5個柱體積，并用0.5M
NaOH再生3-5個柱體積，再用蒸餾水清洗至中性，用20%乙醇保存柱子，或進行下
一次純化。
（6）HABA再生：用脫硫生物-素洗脫目的蛋白的，還可以用HABA緩沖液再生，
一般用HABA的結合緩沖液洗15個柱體積，再用結合緩沖液洗30個柱體積，然后可
以用20%乙醇保存柱子，或進行下一步純化。HABA上柱后凝膠顏色會變為紅橙色，
在結合緩沖液平衡后會恢復正常的白色，這種再生方式一般使用體積會大些。
5.注意事項：
1)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內產生氣泡，影響純化效果。
2)本產品保存條件為20%乙醇，4~8℃。
3) 2-25℃,常壓,避光運輸
4）僅供科研實驗使用
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