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更新時間：2021-04-21 
瀏覽次數：1288高鐵血紅蛋白（MetHb）測試盒如何正確使用
上海信帆生物供應 高鐵血紅蛋白（MetHb）測試盒，產品質量穩定，備有大量現貨。
高鐵血紅蛋白（MetHb）測試盒說明書
一、實驗儀器：試管、微量移液器、旋渦混勻器、可見分光光度計（540、602和630nm）
二、適用范圍：本試劑盒可測各種動物全血等樣本中高鐵血紅蛋白含量；
三、測定意義：體內一氧化氮彌散入血后，很快與氧合血紅蛋白結合形成高鐵血紅蛋白（methemoglobin, MetHb），NO與MetHb變化相關，故全血MetHb檢測近年來受到研究的廣泛重視。同時血液中高鐵血紅蛋白含量的測定對接觸芳香族氨基、硝基化合物所引起的中毒性疾病的診斷與治療，有重要的意義。
四、試劑組成及配制：
A.試劑一：血紅蛋白測定濃縮液，1ml X 2支,2—8℃保存。
血紅蛋白測定應用液的配制：臨用前將濃縮液用雙蒸水1:99稀釋，即100倍稀釋，現用現配。配好的試劑2—8℃避光保存，可存放一個月以上。
B.試劑二: 高鐵血紅蛋白測定濃縮液，30ml X 1瓶，2—8℃。
高鐵血紅蛋白測定應用液的配制： 濃縮液:雙蒸水=1:9稀釋，即10倍稀釋，可存放6個月以上。
C.試劑三：制作還原血紅蛋白曲線用
① 白色粉劑 X 1支，2—8 ℃避光保存。
② 稀釋液，1ml X 1支，2—8 ℃保存。
試劑三應用液配制：臨用前每支粉劑加入1ml稀釋液，現用現配，注意避光。
D.試劑四：制作高鐵血紅蛋白曲線用
① 磚紅色粉劑 X 1支，2—8℃避光保存。
② 稀釋液，1ml X 1支，2—8℃保存。
試劑四應用液配制：臨用前每支粉劑加入1ml稀釋液，現用現配，注意避光
五、操作過程：
1、制備抗凝全血：取全血立即加入到肝素抗凝管內，加蓋封口，輕輕顛倒混勻。
2、血紅蛋白含量的測定：取 0.01ml 全血與 2.5ml 的 100 倍稀釋的試劑一應用液（血紅蛋白測定應用液），混勻，靜置5分鐘后，1cm光徑，雙蒸水調零，540nm處測定各管吸光度值。
3、高鐵血紅蛋白測定： 取0.05ml全血，加入2.5ml的試劑二稀釋應用液（即高鐵血紅蛋白測定應用液），混勻，靜置5分鐘后，1cm光徑，雙蒸水調零，測定630nm處及602nm處吸光度值。如果沒有雙波長的分光光度計則可以先測定各管630nm處吸光度值，然后再測各管602 nm處吸光度值。但一定要注意各管的編號不要弄錯。
六、計算公式：
①、血紅蛋白含量的計算：血紅蛋白克數/升=540nm處吸光度值×367.7
②、高鐵血紅蛋白百分比計算： MetHb% = (A630nm—r x A602nm)÷(A602nm x(R— r)) ×100%
③、高鐵血紅蛋白含量的計算：高鐵血紅蛋白克數 /升 = MetHb%×血紅蛋白克數/升
【注1】 A630即在630nm波長時樣本的吸光度值；A602即在602nm波長時樣本的吸光度值
【注2】 R與r均為常數，R=1.81；r=0.14。（本研究所測定常數）
即計算公式可以簡化為：
①、高鐵血紅蛋白百分比： MetHb% = (A630nm—0.14×A602nm) ÷(A602nm ×1.67) ×100%
②、高鐵血紅蛋白含量的計算：高鐵血紅蛋白克數/升 = MetHb%×血紅蛋白克數 /升
高鐵血紅蛋白（MetHb）測試盒如何正確使用
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