上海信帆生物科技有限公司 全國咨詢熱線：13814106335
PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類
更新時間：2023-06-08 
瀏覽次數：1687免疫組織化學技術(IHC) 現在發展的已經很成熟了，應用范圍也比較廣泛，涉及到各個學科，也是臨床醫學專業的需要掌握的基礎技術之一。免疫組化是應用抗原和抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內抗原，對其進行定位、定性及定量的研究。是臨床病理診斷與科學研究中的一種方法，其中石蠟組織的免疫組化染色是的技術。
Note！脫蠟前將組織芯片放在60℃恒溫箱中烘烤2~3小時
1) 置于二甲苯I中浸泡10分鐘，在二甲苯II中浸泡10分鐘，在二甲苯III中浸泡10分鐘，在二甲苯Ⅳ中浸泡10分鐘；
2) 無水乙醇I中浸泡5分鐘在無水乙醇II中再浸泡5分鐘；
3) 95%乙醇中浸泡5分鐘；
4) 85%乙醇中浸泡5分鐘；
5) 70%乙醇中浸泡5分鐘；
6) 蒸餾水中浸泡5分鐘；
A、高溫高壓熱修復 (酸性修復條件為例)
取一定量的0.01M檸檬酸鹽緩沖液pH6.0于壓力鍋中大火加熱至沸騰，將脫蠟水化后的組織芯片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，蓋上鍋蓋扣上壓力閥繼續加熱至噴氣，從噴氣開始計時1-2分鐘后壓力鍋離開熱源，冷卻至室溫，取出玻片，先用蒸餾水洗兩次后，用PBS洗5分鐘。
B、微波熱修復 (酸性修復條件為例)
取一定量的0.01M檸檬酸鹽緩沖液pH6.0于微波盒中微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的組織芯片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中中，高檔繼續處理10-15分鐘，取出微波盒冷卻至室溫，取出玻片先用蒸餾水洗兩次，后用PBS洗5分鐘。
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶，使用前酶預熱至37℃，切片也預熱至37℃，消化時間為10-30分鐘
1) 脫蠟水化；
2) PBS洗3次，各6分鐘；
3) 抗原修復；
4) 用蒸餾水配置新鮮的3%H2O2-甲醇室溫封閉10分鐘；
5) PBS洗3次，各6分鐘；
6) 滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘；
7) 甩去多余液體滴加一抗4℃過夜；
8) 37℃復溫45分鐘；
9) PBS洗3次，各8分鐘；
10) 滴加二抗，室溫30分鐘；
11) PBS洗3次，各8分鐘；
12) DAB顯色10分鐘在顯微鏡下掌握染色程度；
13) 蒸餾水洗終止染色；
14) 蘇木素復染，鹽酸酒精分化；
15) 脫水透明封片鏡檢；
您的位置：
