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更新時間：2022-09-26 
瀏覽次數：2127ELISA實驗中假陽性產生的原因你清楚嗎？
假陽性本底產生的原因
1 、抗原因素
融合蛋白對基因工程抗原特異性的影響。以丙肝診斷試劑盒為例為例，因為包被的基
因工程抗原為融合蛋白，包含了來自表達載體的一些序列，因此可以與血清中抗大腸桿
菌的因子發生反應而產生了可疑標本。
錯誤排序的影響。合成肽在制備過程中，如果某些肽序列錯誤，會導致合成肽特異性
改變而產生假陽性。另外，在構建基因工程表達載體時引入的HCV 核苷酸發生相位改變或
點突變也會對抗原的特異性產生不利的影響，但由于基因工程技術的不斷進步，由工藝原因
造成的抗原特異性降低會逐漸被克服。
抗原純度對特異性的影響。以HCV 抗原為例，利用大腸桿菌大規模表達后需經破碎
細胞、鹽析、粒子交換柱等分離純化步驟才能最后的到一定純度的HCV 抗原。目前的
工藝還不能做到抗原純度為100％，因此抗原中還混有大腸桿菌的其它雜蛋白，受過大
腸桿菌感染的人，血清中的抗大腸桿菌抗體可和這些雜蛋白產生反應而引起假陽性。
2 科研血清中的正常IgG
科研血清中IgG 的濃度對HCV 試劑盒有較大的影響。HCV 試劑盒采用的間接法，酶標抗
抗體能與人所有IgG 結合，而IgG 吸附于板孔的能力很強，因此我們采用100 微升樣稀加
10 微升血清來將其稀釋以降低本底。到成人時，據統計學調查，成人的IgG 為12mg/ml，
而有些人的IgG 濃度會遠遠高于此，這部分人的血清經ELISA 反應后往往會顯色。
人血情中異常的IgG
結締組織病（系統性紅斑狼瘡、多發性骨髓瘤等）等病癥時，血清中的風濕小體和其它
異常IgG（IgG 濃度達到50mg/ml）會引起本底升高或假陽性。
溶血的影響
當溶血時，紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中，血紅蛋白具有過氧化物酶的性質，當其通
過吸附或“PP 效應"（蛋白質間相互吸附的現象）結合后，可催化A、B 液顯色而造成假陽
性。
ELISA實驗中假陽性產生的原因你清楚嗎？
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