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更新時間：2020-04-16 
瀏覽次數：1792全血線粒體提取試劑盒，現貨供應
上海信帆生物供應全血線粒體提取試劑盒，可以提取血液中線粒體，產品現貨供應，歡迎大家隨時咨詢！
一，試劑盒組份
組份 XF9701-A (50T) XF9701-A (100T)
紅細胞裂解液（10X） 100ml 100ml*2
白細胞裂解液 50 mL 100 mL
線粒體清洗液 25 mL 50 mL
線粒體保存液 5 mL 10 mL
二，保存條件
本試劑盒三個月內使用可 4℃儲存，長期可置-20℃。
三，說明
本試劑盒可用于從血液中分離完整而純化的線粒體。
其制備物，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。但不適用于進一步 DNA 提取。
四，操作步驟
1. 血液處理：
血液要求：非肝素鈉抗凝血，使用新鮮血液。對于陳舊血液，由于凍凝過程中冰晶已經對細胞核膜和
線粒體膜產生損傷，所以線粒體得率會大大減少，并且完整性也會降低。
a. 對于無核紅細胞全血（如哺乳動物處周血），取血約 5ml（適當分成幾管），加入 3 倍體積的紅細胞裂
解液（稀釋后的工作液,下同），混勻，800 × g
5 min 離心收集白細胞。加入 1-2ml 紅細胞裂解液（稀
釋后的工作液），吹打重懸白細胞，合并于一管中，800 × g 5~10 min 離心收集白細胞。此時如果白細
胞有可見紅色，可再次用少量(0.5ml)紅細胞裂解液洗細一次。
b. 對于有核紅細胞全血（如禽類全血），取約 200-300ul 全血，800 × g 5~10 min 離心收集全細胞，用
生理鹽水或者 PBS 清洗兩次，留沉淀去上清。清洗時請用去尖吸頭吹打。
2. 在收集到的細胞中，加入 1.0 mL 冰預冷的白細胞裂解液重懸細胞，將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿
器內，0℃冰浴研磨 20~40 次；
3. 勻漿物轉移到離心管，4℃，1000× g 離心 5 min；
4. 取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000× g 再次離心 5 min（一共兩次離心，完整去核）。
5．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心 10 min。離心后的上清含胞漿成分，可從中
提取胞漿蛋白。將上清轉移到新離心管，線粒體沉淀在管底；
6. 在線粒體沉淀中加入 0.5 mL 線粒體清洗液重懸線粒體沉淀，4℃，1000× g 離心 5 min(再次去核）；
7．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心 10 min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管
底；
8. 用 50 -100μL 線粒體保存液或合適的反應緩沖液重懸線粒體沉淀，立即使用或-70℃保存。
四 注意事項：
為保證獲得完整及盡可能多的線粒體，勻漿條件要示：一是全程低溫操作。第二是快速。第三，如有條
件可將勻漿后的碎片在顯微鏡下觀察。
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