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更新時間：2020-02-26 
瀏覽次數：3809IMAC(His) 預裝柱的使用方法-上海信帆生物
上海信帆生物供應IMAC(His) 預裝柱，產品質量穩定，價格實惠，深受廣大科研用戶青睞！
建議使用高純度的咪唑，高純度的咪唑在280nm的吸光值較低，甚至不顯示吸光值。緩沖液中咪唑的佳濃度因蛋白的濃度和性質而異。
如果重組His標簽蛋白是以包涵體的形式表達，建議在各緩沖液或樣品中添加6M鹽酸胍或8M尿素。使用高濃度的尿素或鹽酸胍，有可能引起蛋白變性，變性蛋白可以實現復性。
當純化柱所需柱壓明顯升高時，則需要清洗，清洗方法如下：
a. 用至少5~10倍體積的100mM EDTA清洗柱體；
b. 用10倍體積的1.5M NaCl清洗柱體；
c. 用10倍體積的蒸餾水清洗柱體；
d. 用0.2M NaOH處理1~2小時（清除內毒素需12小時）；
e. 用10倍體積的蒸餾水清洗柱體；
f. 用2倍體積0.1~0.5%的非離子去污劑（溶于0.1M醋酸）處理1-2小時；
g. 用5倍體積70%的乙醇清洗柱體；
h. 用10倍體積的蒸餾水清洗柱體。
保存溫度：
用20%的乙醇在中性pH值的條件下沖洗介質和柱子，在4℃~8℃條件下儲存。
應用實例：
哺乳動物細胞表達的HIS標簽蛋白，其細胞分泌上清通過IMAC(His)柱進行富集濃縮，高效地純化回收。
圖例）
泳道1：上樣；
泳道M：Protein Marker；
泳道3：流出；泳道4：洗脫1；
泳道5：洗脫2；泳道6：洗脫3。
產品描述:
螯合的Sepharose，當帶有Ni2+離子時，如果形成氨基酸殘基的復合物，特別是組氨酸殘基被暴露在蛋白質表面時，可以選擇性的結合蛋白質。(His)6融合蛋白可以很容易的結合到親和柱上，然后用含有咪唑的緩沖液進行洗脫。
產品用途：
His融合蛋白的純化。
IMAC(His) 預裝柱的使用方法-上海信帆生物
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